1聽主题内容与适用范围
本标准规定了用4-甲基伞形酮辛酯试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。
本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验,其他食品可参照使用。
2聽引用标准SN聽0170聽出口食品中沙门氏菌(包括亚利桑那菌)检验方法
3聽符号MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4-甲基伞形酮辛酯)的缩写。MUCAP:试剂:用4-甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。SS琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。HE琼脂:Hektoen聽Enteric聽琼脂培养基。
4聽设备与材料
4.1聽紫外光灯:波长366聽nm,功率≥6W。
4.2聽放大镜:3~4X。
4.3聽毛细滴管。
5聽培养基与试剂培养基与试剂按聽SN聽0170聽第5章,另补充以下部分:
5.1聽SS琼脂培养基(含1%蔗糖):见附录聽A1。
5.2聽HE琼脂培养基:见附录聽A2。
5.3聽MUCAP试剂:见附录聽A3。
5.4聽氧化酶试纸:见附录聽A4。
6聽样品制备及增菌培养参照SN聽0170进行。
7聽分离培养
7.1聽将增菌培养液摇匀,挑取一接种环,划线接种于SS和HE琼脂培养基各一个,于36±1℃培养聽24±2h。
7.2聽观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落,应再继续培养24±2h。沙门氏菌的菌落特征见表聽1。
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽表聽1聽沙门氏菌属菌落特征
培养基 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽菌聽落聽特聽征
SS平板 圆形,边缘整齐;淡黄色,半透明,有或无黑色中心;周围培养基透明淡黄色
HE平板 圆形,边缘整齐;蓝绿色至蓝色,有或无黑色中心;周围培养基透明墨绿色
8聽测定
8.1聽从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落),用玻璃笔做好标记并编号。
8.2聽用毛细滴管吸取聽MUCAP试剂,加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部滴加试剂后,将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为聽MUCAP试验阳性,将阳性菌落号记录下来。
8.3聽用接种环挑取荧光反应阳性菌落,涂于氧化酶试纸上,观察涂菌点是否变蓝色。于10min内变蓝色为氧化酶试验阳性;不变色为阴性。
9聽结果的报告
9.1聽MUCAP试验阴性的样品,报告为“未检出沙门氏菌”
9.2聽MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品,按SN聽0170第四章继续进行生化和血清学试验,并根据试验结果报告。聽聽聽
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