(1)聽聽将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,
(2)聽聽稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。
(3)聽聽OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。
(4)聽聽将细胞悬浮于400μl AE缓冲液(
(5)聽聽加入1/10体积的10% SDS,充分混合。聽
(6)聽 加入等体积在
(7)聽聽
(8) 聽在室温下8000rpm/min离心10min。
(9)聽聽取水相,加入等体积的酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1),10000rpm/min离心8min。
(10)聽 取水相,加入等体积氯仿/异戊醇(49∶1)10000rpm/min离心8min。
(11)聽 加入1/10体积
(12)聽 沉淀样品于
(13)聽 在冰上干燥RNA(放置15min),最后用适量DEPC水溶解RNA。
聽
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