聽聽聽聽 一、目的要求
聽聽聽聽 通过对分离真菌用的马丁氏(Martin)培养基配制,掌握对选择培养基的配制方法,并明确选择的原理。
聽聽聽聽 二、基本原理
聽聽聽聽 马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4鈥↑/SPAN>7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH2PO4和MgSO4鈥↑/SPAN>7H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。
聽聽聽聽 马丁氏培养基配方如下:
聽聽聽聽 KH2PO4 1g
聽聽聽聽 MgSO4鈥↑/SPAN>7H2O 0.5g
聽聽聽聽 蛋白胨 5g
聽聽聽聽 葡萄糖 10g
聽聽聽聽 琼脂 15—20g
聽聽聽聽 水 1000ml
聽聽聽聽 pH 自然
聽聽聽聽 此培养液1000ml加1%孟加拉红水溶液3.3ml。临用时每100ml培养基中加1%链霉素液0.3ml。
聽聽聽聽 三、器材
聽聽聽聽 KH2PO4,MgSO4鈥↑/SPAN>7H2O,蛋白胨,葡萄糖,琼脂,孟加拉红,链霉素;
聽聽聽聽 试管,三角烧瓶,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅等。
聽聽聽聽 四、操作步骤
聽聽聽聽 1.称量和溶化
聽聽聽聽 按培养基配方,准确称取各成分,并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的溶液,在1000ml培养液中加入1%的孟加拉红溶液3.3ml,混匀后,加入琼脂加热溶化(方法同实验十九)。
聽聽聽聽 2.分装、加塞、包扎、灭菌,无菌检查与实验十九相同。
聽聽 聽聽3.链霉素的加入
聽聽聽聽 由于链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基溶化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液,在100ml培养基中加1%链霉素液0.3ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
聽聽聽聽 五、实验报告
聽聽聽聽 思考题
聽聽聽聽 (1)什么是选择培养基?它在微生物学工作中有何重要性?
聽聽聽聽 (2)培养细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的最适pH值各为多少?
聽
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