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一、试验原理：
聽
聽用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T4789.32－2002)。
聽胰酪胨提供氮源、维生素和矿物质满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂；月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌；大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶，分解培养基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal)，使茜素游离，并与培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色(或红色)的螯合物，使菌落呈现相应的颜色。
聽
二、培养基配方（g/L）：
聽
|
胰酪胨 |
20.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
磷酸氢二钾 |
2.75 |
|
磷酸二氢钾 |
2.75 |
|
月桂基硫酸钠 |
0.1 |
|
异丙基硫代半乳糖苷 |
0.03 |
|
硫酸铝钾 |
0.5 |
|
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
茜素-β-D-半乳糖苷 |
0.05 |
|
pH 7.1±0.1 |
25℃ |
三、试验方法：
聽
聽1、称取本品46.7g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，116℃高压灭菌10分钟，冷却至50℃左右时，倾入无菌平皿，备用。
聽2、制备好的平板保存于2-8℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，室温保存。
聽4、使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
聽5、制备质控菌液。选择合适稀释度的质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。36±1℃℃倒置培养基培养18-24小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释聽
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聽接种以下质控菌株，36±1℃需氧培养18-24小时：
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
粉色菌落 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫红色菌落 |
|
阴沟肠杆菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫红色菌落 |
|
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫红色菌落 |
a：大肠埃希氏菌，b:金黄色葡萄球菌，c:伤寒沙门氏菌，d:阴沟肠杆菌，e：弗氏柠檬酸杆菌，f:空白对照
五、注意事项
聽
聽本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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聽注：本文属海博论坛论坛生物原创，未经允许不得转载。
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