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      强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)原理和使用方法

      丁鑫鑫
      录入时间:2023-1-17 10:45:48 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、试验用途及原理:

      聽 用于食品和其他物质中梭菌的培养和计数。

      聽 胰酪蛋白胨,牛肉浸粉,蛋白胨,可溶性淀粉,酵母浸粉和L-半胱氨酸盐提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;刃天青是氧化还原指示剂;醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌;柠檬酸铁铵和亚硫酸钠是硫化氢指示剂;琼脂是培养基凝固剂。


      二、培养基配方(g/L):

      胰酪蛋白胨

      5.0

      蛋白胨

      5.0

      牛肉浸粉

      8.0

      可溶性淀粉

      1.0

      酵母粉

      1.0

      葡萄糖

      1.0

      L-半胱氨酸盐酸盐

      0.5

      醋酸钠

      5.0

      刃天青

      0.002

      柠檬酸铁铵

      0.5

      亚硫酸钠

      0.75

      琼脂

      15.0

      pH 7.6±0.2 25℃


      三、试验方法:

      聽 粉体装培养基的使用:

      聽 1. 称取本品 42.75g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌15分钟,备用。

      聽 2. 制备质控菌液。

      聽 3. 吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内,每个稀释度做两个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的待测培养基15ml,缓慢旋转平皿,使质控菌液和培养基充分混匀。

      聽 上述琼脂平板凝固后,再加入10ml冷却至50℃的待测培养基均匀覆盖平板表层。

      聽 4. 待琼脂凝固后,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


      四、结果观察与解释

      聽 接种以下质控菌株,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时:

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      参比或计数培养基

      方法

      质控评定标准

      其他特征

      产气荚膜梭菌

      ATCC13124

      20-200

      TSC

      定量

      PR≥0.7

      黑色菌落


      强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果

      图1-1聽强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果


      五、注意事项

      聽 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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      注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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