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一、用途
聽 用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。
二、培养基配方（g/L）：
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸二氢钾 |
2.5 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
无水亚硫酸钠 |
3.3 |
|
碱性品红 |
0.3 |
|
琼脂 |
12.5 |
|
pH7.4±0.2聽25℃ |
|
聽 此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果。
三、试验原理:
聽 蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸二氢钾是缓冲剂；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；碱性品红为指示剂，具有醌式结构，呈深红色，亚硫酸钠能将碱性品红还原，使其褪色，所以制成的培养基呈淡粉红色；发酵乳糖的细菌产生乙醛，与亚硫酸钠结合，可恢复碱性品红的醌式结构，所以菌落呈深红色；沙门氏和志贺氏菌属细菌不发酵乳糖，故菌落与培养基同为淡红色或无色；琼脂是培养基的凝固剂。
四、试验方法：
聽 1. 称取本品39.0g，加入20ml无水乙醇和980ml蒸馏水中加热搅拌溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。
聽 2. 制备质控菌液，选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于待测平板以及参比平板上，每一稀释度接种两个平板。
聽 3. 用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。
聽 4. 36±1℃倒置培养基培养24±2小时，记录实验结果。
五、试验结果：
聽 接种以下质控菌株，36±1℃需氧培养22-26小时：
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数 培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫红色菌落，有金属光泽 |
|
产气肠杆菌 |
CMCC(B)45103 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫红色菌落 |
|
阴沟肠杆菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫红色菌落，有金属光泽 |
|
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫红色菌落，有金属光泽 |
|
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
无色菌落 |
图1 聽Endo培养基微生物质控结果
备注：a：阴沟肠杆菌，b:弗氏柠檬酸杆菌，c:产气肠杆菌，d:大肠埃希氏菌，e：沙门氏菌，f:金黄色葡萄球菌
六、方法的局限性：
聽 本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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注：本文属海博论坛论坛生物原创，未经允许不得转载。
聽
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