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    志贺氏菌(BCT)增菌液原理及实验现象

    卢悦
    录入时间:2024-11-21 16:44:35 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、培养基用途:

    聽 用于志贺氏菌増菌培养。


    二、培养基成分:

    成分

    含量(g/L)

    蛋白胨

    20.0

    复合氨基酸

    2.0

    牛肉浸粉

    5.0

    三号胆盐

    4.5

    柠檬酸钠

    4.5

    硫代硫酸钠

    4.5

    pH 7.2±0.1聽25℃


    三、原理:

    聽 蛋白胨,复合氨基酸,牛肉浸粉提供蛋白质,维生素和氨基酸;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌生长,对革兰氏阴性菌杆菌只有轻微的抑制能力。


    四、操作方法

    聽 1、称取本品40.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15min。

    聽 2、制备工作菌悬液。

    聽 3、接种

    聽 目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):接种10CFU-100CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(与试管同一稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。

    聽 非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):接种1000CFU-5000CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(比待测培养基试管接种小10-100倍稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。

    聽 接种后41.5℃±1℃培养16-20小时。

    图一: 志贺氏菌(BCT)增菌液41.5℃培养18小时后

    聽 4、41.5℃±1℃培养16-20小时

    聽 目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到XLD平板。

    聽 非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到非选择性平板上(如:TSA)。

    聽 5、接种后的培养基置于36℃±1℃培养24±2h

    图二:试管转接平板后试验现象

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    质量评定标准

    特征性反应

    褔氏志贺氏菌

    CMCC(B) 51572

    10-100

    在XLD上>10CFU

    无色透明菌落

    金黄色葡萄球菌

    CMCC(B) 26305

    1000-5000

    在TSA上<100CFU

    /



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