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          聽聽首页 > 微生物知识->微生物基本知识->荚膜染色法— 实验方法

          荚膜染色法— 实验方法



          录入时间:2008-11-14 15:14:49 来源:青岛海博论坛论坛生物

          聽聽聽
          (1)黑斯荚膜染色法聽
          ①在荚膜菌涂片上(在空气中聽自然干燥,无需加热固定)放一小块滤纸片,之后滴加结晶紫染液。聽
          ②在火焰上微微加热,使玻片上染液聽冒蒸汽为止。聽
          ③用200g/l硫酸铜水溶液冲洗染液,切勿用流水冲洗。用吸水纸吸干后油镜检查。聽
          结果:菌体呈紫色,荚膜呈淡紫色或无色。聽
          (2)密尔荚膜染色法聽
          ①制片。常规法制片,干后加热固定。聽
          ②染色。加石炭酸复红液。微加热染1min,水洗。聽
          ③媒染。加特殊媒染剂,作用0.5min,水洗。聽
          ④复染。加碱性美蓝液,染1min,水洗。聽
          ⑤镜检。干后油镜检查。聽
          聽聽聽聽结果:菌体呈鲜红色,荚膜呈蓝色。聽
          (3)奥尔特荚膜染色法涂片、自然干燥、火焰聽固定后滴加染液,经火焰加温使染液产生蒸汽后,继续染3min,水洗,待干,镜检。聽
          聽聽聽聽结果:菌体呈赤褐色,荚膜呈黄色。聽
          (4)湿墨水负染法聽
          ①加一滴墨水于洁净的载玻片上,然后挑取少量菌体与其混合均匀。聽
          ②将一洁净盖玻片盖在混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,轻轻按压以吸去多余的混合液。加盖玻片时勿产生气泡,以免影响观察。聽
          ③高倍镜或油镜检查。聽
          聽聽聽结果:背景灰色,菌体较暗,在菌体周围呈现明亮的透明圈。聽
          (5)干墨水负染法聽
          ①加一滴60g/l葡萄糖液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一环墨水,充分混匀。聽
          ②另取一端边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉,当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,尔后以大约30°角迅速将混合液推聽向玻片另一端,使混合液铺成薄层。聽
          ③空气中自然干燥聽。聽
          ④用甲醇浸没涂片固定1min,弃去聽甲醇。聽
          ⑤在酒精灯上方用文火干燥聽。聽
          ⑥用甲基紫染1—2min。聽
          ⑦用自来水轻轻冲洗,自然干燥聽。聽
          ⑧高倍镜或油镜检查。聽
          聽聽结果:背景灰色,菌体紫色,菌体周围为清晰透明的荚膜。聽
          (6)石炭酸复红液染色法聽
          ①取培养了72h的荚膜菌制成涂片,自然干燥(不可用火焰烘干)。聽
          ②滴加1—2滴95%酒精固定(不可加热固定)。聽
          ③加石炭酸复红染液染色1—2min,水洗,自然干燥聽。聽
          ④在载玻片一端加一滴墨水,用一块边缘光滑的载玻片与墨水接触,再以匀速推向另端,涂成均匀的一薄层,自然干燥聽。聽
          ⑤干燥后用油镜观察。聽
          聽聽聽结果:菌体红色,荚膜无色,背景黑色。

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