1聽聽主题内容与适用范围聽聽
聽聽聽聽聽本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。聽聽
聽聽聽聽聽本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球的检验。聽聽
2聽聽引用标准聽聽
聽聽聽聽GB聽聽4789.28聽食品卫生微生物学检验聽聽染色法、培养基和试剂聽聽
3聽聽设备和材料聽聽
3．1聽聽温箱：36±1℃。聽聽
3．2聽聽水浴：36±1℃。聽聽
3．3聽聽显微镜。聽聽
3．4聽聽离心机。聽聽
3．5聽聽试管架。聽聽
3．6聽聽灭菌平皿。聽聽
3．7聽聽灭菌小试管。聽聽
3．8聽聽载玻片。聽聽
3．9聽聽灭菌吸管：1聽mL、10聽mL。聽聽
3．10聽聽灭菌镊子。聽聽
3．11聽聽均质器。聽聽
3．12聽聽酒精灯。聽聽
3．13聽聽接种环。聽聽
4聽聽培养基和试剂聽聽
4．1聽聽葡萄糖肉浸液肉汤：按GB聽4789.28聽中4.1聽规定，在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。聽聽
4．2聽聽肉浸液肉汤：按GB聽4789.28聽中4.1聽规定。聽聽
4．3聽聽匹克氏肉汤：按GB聽4789.28聽中4.62聽规定。聽聽
4．4聽聽血琼脂平板：按GB聽4789.28聽中4.6聽规定。聽聽
4．5聽聽人血浆。聽聽
4．6聽聽0.25%氯化钙。聽聽
4．7聽聽灭菌生理盐水。聽聽
4．8聽聽杆菌肽药敏纸片（含聽0.04聽单位）。聽聽
5聽聽检验程序聽
6聽聽操作步骤聽聽
6．1聽聽样品处理聽聽
聽聽聽聽称取聽25聽g聽固体检样；称取25聽mL聽液体检样，加入聽225聽mL聽灭菌生理盐水，聽
研成匀浆制成混悬液。聽聽
6．2聽聽一般培养聽聽
聽聽聽聽将上述混悬液吸取聽5聽mL，接种于聽50聽mL聽葡萄糖肉浸液肉汤；或直接划线接聽
种于血平板，如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经聽36±1℃培聽
养聽24聽h，挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血聽
情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。聽聽
6．3聽聽形态与染色聽聽
聽聽聽聽本菌呈球形或卵圆形，直径聽0.5～1聽μm，链状排列，链长短不一，短者4～8聽
个细胞组成，长者聽20～30聽个，链的长短常与细菌的种类及生长环境有关；液体聽
培养中易呈长链；在固体培养基中常呈短链，不形成芽孢，无鞭毛，不能运动。聽聽
6．4聽聽培养特性聽聽
聽聽聽聽该菌营养要求较高，在普通培养基上生长不良，在加有血液、血清培养基中聽
生长较好。溶血性链球菌在血清肉汤中生长时管底呈絮状或颗粒状沉淀。血平板聽
上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.5～0.75聽mm，聽
为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有2～4聽mm聽界限分明、无色透明的聽
溶血圈。聽聽
6．5聽聽链激酶试验聽聽
聽聽聽聽聽致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶（即溶纤维蛋白酶），此酶能激活正聽
常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白。聽聽
聽聽聽聽聽吸取草酸钾血浆0.2聽mL，加聽0.8聽mL聽灭菌生理盐水，混匀，再加入聽18～24聽h36聽
±1℃培养的链球菌培养物0.5聽mL聽及聽0.25%氯化钙0.25聽mL（如氯化钙已潮解，聽
可适当加大至聽0.3%～0.35%），振荡摇匀，置于聽36±1℃水浴中聽10聽min，血浆混聽
合物自行凝固（凝固程序至试管倒置，内容物不流动）。然后观察凝块重新完全聽
溶解的时间，完全溶解为阳性，如聽24聽h聽后不溶解即为阴性。聽聽
聽聽聽聽草酸钾人血浆配制：草酸钾聽0.01聽g放入灭菌小试管中，再加入聽5聽mL人血，聽
混匀，经离心沉淀，吸取上清液即为草酸钾人血浆。聽聽
6．6聽聽杆菌肽敏感试验聽聽
聽聽聽聽挑取乙型溶血性链球菌液，涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有聽0.04聽
单位的杆菌肽纸片，放于上述平板上，于聽36±1℃培养聽18～24聽h，如有抑菌带出聽
现即为阳性。同时用已知阳性菌株作为对照。聽聽聽
聽聽聽

聽

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