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    出口畜产品中炭疽杆菌检验方法——3



    录入时间:2008-12-18 15:37:56 来源:青岛海博论坛论坛生物聽

    7聽结果的判定和报告
    7.1聽结果的判定在菌落形态、细菌形态和肉汤生长特性三项中有一项不符合炭疽杆菌特征时,判为非炭疽杆菌。在其余五项试验(确定试验)中有两项或更多项不符合炭疽杆菌特征时,判为非炭疽杆菌;全部符合或仅有一项不符合炭疽杆菌特征时,判为有炭疽杆菌。7.2聽结果的报告
    7.2.1聽凡结果判为非炭疽杆菌的检验样品,报告该样品所代表的同批产品“经检验未发现炭疽杆菌”。
    7.2.2聽凡结果判为有炭疽杆菌的检验样品,报告该样品所代表的同批产品“经检验发现炭疽杆菌”。
    附聽录聽A培养基和试剂(补充件)
    A1聽溶菌酶多粘菌素琼脂(Knisely)
    营养琼脂(见A4)聽1聽000mL
    多粘菌素聽3聽000IU
    溶菌酶聽4聽mg/mL聽
    溶液聽10聽mL
    乙酸亚铊聽4聽mg/mL聽溶液聽10聽mL
    EDTA聽20聽mg/mL聽溶液聽10聽mL
    除营养琼脂外,将其他成分用灭菌蒸馏水配成适当贮备液,按以上量加于冷至聽50~55℃聽的灭菌营养琼脂内,充分摇匀,倾注平板。
    A2聽戊烷脒多粘菌素琼脂
    A2.1聽基础培养基
    牛肉膏聽3.0g
    蛋白胨聽20.0g聽
    氯化钠聽5.0g
    琼脂聽20.0g
    蒸馏水聽1聽000.0mL
    将各成分加于蒸馏水中,煮沸至完全溶解,调整pH至7.4,过滤,分装于三角烧瓶中,每瓶400mL,121℃高压灭菌聽20min。临时用加热融化,放于聽45~50℃恒温水浴内保温。
    A2.2聽戊烷脒稀释液称取戊烷脒聽0.1g,溶于聽4mL灭菌蒸馏水内。贮存在聽0~4℃聽冰箱,备用。
    A2.3聽多粘菌素稀释液取多粘菌素聽B一瓶,加灭菌蒸馏水使其溶解,再用灭菌蒸馏水将其稀释为3000IU/mL。贮存于0~4℃冰箱,备用。
    A2.4聽脱纤维羊血以无菌操作采羊血聽50~10聽mL聽,注入含玻璃小珠的灭菌三角烧瓶中,立即转摇数分钟。贮存于聽0~4℃冰箱,备用。
    A2.5聽完全培养基基础培养基(45~50℃)聽400.0聽mL戊烷脒稀释液聽0.4聽mL多粘菌素稀释液聽0.4聽mL脱纤维羊血聽8.0聽mL以无菌操作将后三种成分加入基础培养基内,充分摇匀,倾注于灭菌皿内,每皿15mL左右。
    A3聽营养肉汤.
    牛肉膏聽3.0g
    蛋白胨聽20.0g
    氯化钠聽5.0g
    蒸馏水聽1000.0mL
    将各成分溶于蒸溜水中,调整pH至7.4,分装于试管内,每管1.0mL,121℃高压灭菌15min。聽
    A4聽营养琼脂
    牛肉膏聽3.0g
    蛋白胨聽20.0g
    氯化钠聽5.0g
    琼脂聽20.0g
    蒸馏水聽1聽000.0mL
    将各成分加于蒸馏水中,煮沸至完全溶解,补足失去的水分,调整pH至7.2,过滤,121℃聽高压灭菌聽20聽min聽。待冷至聽50℃左右时,倾注于平皿,制成平板。聽聽聽
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