附　录聽A　培聽养聽基聽制聽备聽(补充件)
A1聽甘露醇卵黄多粘菌素琼脂培养基(MYP)　　
a.聽　基础琼脂聽　　　聽　
牛肉膏　1.0g　　　聽　
蛋白胨聽10.0g　　　聽　
D-甘露醇聽10.0g　　　聽　
氯化钠聽10.0g　　　聽　
琼　脂聽15.0g　　　聽　
酚　红聽0.025g(配成溶液加入)　　　聽　
蒸馏水　　稀释至900mL　　
b.聽50％卵黄液聽50mL　　
c.聽多粘菌素B聽100聽IU/mL　　
聽聽将a.中的前5种成分加入蒸馏水中加热溶解,校正pH至7.2±0.1,加入酚红溶液,混匀后分装烧瓶中,每瓶225聽mL。121℃高压灭菌15min。用时加热溶化,冷至50℃后每瓶加入50％卵黄液12.5mL和2.5mL多粘菌素B溶液,混匀后倾注灭菌平皿,每皿15～18mL。用前应将平板置室温约24聽h。　
　注：①50％卵黄液：取鲜鸡蛋,用硬刷将蛋壳彻底洗净,沥干,放于70％酒精溶液中浸泡1聽h。以无菌操作取出卵黄,加入等量灭菌生理盐水,混匀后备用。　
　②多粘菌素B溶液：在50mL灭菌蒸馏水中溶解500聽000国际单位的无菌硫酸盐多粘菌素B。
A2　胰酪胨大豆多粘菌素肉汤　　　　
胰酪胨聽17.0g　　　　
植物胨　　　　　　　　　　聽3.0g　　　聽
氯化钠　　　　　　　　　　聽5.0g　　　聽
磷酸氢二钾　　　　　　　　聽2.5g　　　聽
葡萄糖　　　　　　　　　　聽2.5g　　　　
蒸馏水　　　　　　　　　　稀释至1000mL　　　
pH7.3±0.1　　
聽聽将上述各成分溶解在蒸馏水中,煮沸2min,分装大试管,每管15聽mL,121℃高压灭菌15min。临用时每管加入0.5％多粘菌素B溶液0.1mL混匀即可。　
　注：多粘菌素B溶液：在33.3mL灭菌蒸馏水中溶解500聽000国际单位无菌硫酸盐多粘菌素B。
A3　酚红葡萄糖肉汤　　　聽
(月示)胨　　　　　　　　　　10.0g　　　聽
牛肉膏　　　　　　　　　　聽1.0g　　　聽
氯化钠　　　　　　　　　　聽5.0g　　　聽
葡萄糖　　　　　　　　　　聽5.0g　　　聽
酚　红　　　　　　　　　　0.018g(配成溶液加入)　　　聽
蒸馏水　　　　　　　　　　　稀释至1000mL聽聽聽聽聽聽聽
pH7.4±0.1　
　将除酚红外的各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后加入酚红溶液,混匀,分装试管,每管3聽mL。121℃高压灭菌10min备用。最终pH7.4±0.1
A4　硝酸盐肉汤　　　　
牛肉膏　　　　　　　　　　聽3.0g　　　　
蛋白胨　　　　　　　　　　　5.0g　　　　
硝酸钾　　　　　　　　　　　1.0g　　　　
蒸馏水　　　　　　　　　　　稀释至1000mL　　　　
pH7.0±0.1　
　将上述各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后分装试管,每管5mL,121℃高压灭菌15min。
A5　营养琼脂　　　　
牛肉膏　　　　　　　　　　　3.0g　　　　
蛋白胨　　　　　　　　　　　5.0g　　　　
琼聽脂聽稀释至1000mL　　　　
pH7.2±0.1　
　将各成分于蒸馏水中加热溶解。校正pH后分装试管,每管5～7mL；或分装烧瓶,每瓶100～150mL。121℃高压灭菌15聽min。将试管取出,制成斜面；如制平板,可将灭菌的琼脂冷至45～50℃倾注灭菌平皿,每皿18～20mL。
A6聽L-酪氨酸营养琼脂　　　　
营养琼脂聽100mL　　　　聽
5％灭菌L-酪氨酸悬液聽10mL　
　将100mL营养琼脂溶化,冷至45℃,加入5％的灭菌L-酪氨酸悬液10mL,充分混匀后,分装试管,每管3.5mL。制成的斜面应迅速冷却防止L-酪氨酸分离而出。　
　注：L-酪氨酸悬液：将0.5g酪氨酸加10mL蒸馏水混匀,121℃高压灭菌15min。聽聽聽
聽聽聽

聽

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