4鉴定
4.1筛选试验
4.1.1每个琼脂平板至少应挑选2个典型或可疑菌落,分别用接种针接种赖氨酸脱羧酶培养基或尿素酶琼脂一管,接种后无须灭菌接种针,直接再接种三糖铁琼脂一管于37℃培养24±2h。
4.1.2　挑取菌落后的琼脂平板,应置于4～8℃至少保留24聽h,以备必要时复查。
4.1.3　按表2或表3结果进行判断。
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽表2　三糖铁琼脂和赖氨酸脱羟酶培养基筛选
三聽糖聽铁聽琼聽脂 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽赖氨酸脱羧酶培养基 聽聽聽聽聽聽聽聽初步判断
斜聽面 底聽层 产聽气 硫化氢
K A ＋(－) ＋(－) + 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽可疑沙门氏菌属
K A ＋(－) ＋(－) - 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽可疑沙门氏菌属
A A ＋(－) ＋(－) + 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽可疑沙门氏菌属
A A ＋(－) ＋(－) - 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非沙门氏菌属
K K ＋/－ ＋/－ ＋/－ 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非沙门氏菌属
注:聽K—产碱;聽＋—阳性反应;聽(－)—少见反应；A—产酸;聽－—阴性反应;聽＋/－─阳性或阴性反应。
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽表3聽三糖铁琼脂和尿素酶琼脂筛选聽
三聽糖聽铁聽琼聽脂 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽尿素酶琼脂 聽聽初步判断
斜聽面 底聽层 产聽气 硫化氢
K A ＋(－) ＋(－) - 聽聽可疑沙门氏菌属
A A ＋(－) ＋(－) - 聽聽可疑沙门氏菌属
K A ＋(－) ＋(－) + 聽聽非沙门氏菌属
A A ＋(－) ＋(－) + 聽聽非沙门氏菌属
K K ＋/－ ＋/－ ＋/－ 聽聽非沙门氏菌属
注:聽K—产碱;聽＋—阳性反应;聽(－)—少见反应；A—产酸;聽－—阴性反应;聽＋/－─阳性或阴性反应。
4.2聽生化试验
4.2.1聽将符合表2或表3可疑沙门氏菌属特性的三糖铁琼脂培养物,按表4进行生化试验聽(表中赖氨酸脱羧酶试验或尿素酶试验的结果见4.1结果,不再另做)。
聽表4聽沙门氏菌属生化反应
序聽号 生聽化聽项聽目 聽聽聽聽聽聽聽聽聽反聽应
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽沙门氏菌 亚利桑那菌
1 尿素酶试验 聽聽聽聽- 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽-
2 V-P试验 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽- 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽-
3 氰化钾试验 聽聽聽聽- 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽-
4 赖氨酸脱羧酶试验 聽聽聽聽+ 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽+
5 吲哚试验 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽- 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽-
6 丙二酸钠试验 聽聽聽聽- 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽+
7 卫矛醇试验 聽聽聽聽d 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽-
注:聽＋—阳性反应；－—阴性反应；d—反应不定。聽
4.2.2　所有生化试验管均于37℃培养24±2聽h。
4.2.3　生化试验结果符合表4沙门氏菌属特性的按4.3进行。
4.3　血清学试验
4.3.1　检查培养物有无自凝性
在洁净的玻片上加一滴生理盐水,将待试培养物混合于生理盐水滴内,使成为均一性的混浊悬液,将玻片轻轻摇动30～60聽s,在黑色背景下观察反应(最好用放大镜观察)。如菌体彼此相凝集成明显或比较明显小颗粒状物,即认为有自凝性。反之无自凝性。
4.3.2　检查“O”抗原
对无自凝性的培养物,按照4.3.1的程序进行试验,但以多价“O”血清代替生理盐水,聽在2min内判断结果。如为阳性结果以单价“O”血清进行分群试验。如为阴性结果,必要时,可结合4.2结果按4.3.3进行试验,再以多价和单价“O”血清进行试验。聽
4.3.3　检查“Vi”抗原
按照4.3.1的程序进行,但以“Vi”血清代替生理盐水。
4.4　根据4.2和4.3试验结果,按照表5进行判定。聽
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽表5　沙门氏菌属生化试验与血清学试验结果判定
类别聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽生化试验 聽聽聽聽聽聽聽聽血清学试验聽聽聽聽聽聽其他试验聽聽聽聽聽聽判定
1聽聽聽聽符合表4中沙门氏菌生化特性聽聽"O"因子血清分群阳性 聽聽聽聽聽聽聽聽沙门氏菌
2聽聽聽聽符合表4中沙门氏菌生化特性聽聽"O"因子血清分群阴性聽菌落典型,
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽镜检革蓝氏 沙门氏菌
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽阴性无芽胞杆菌
3聽聽聽聽尿素酶试验阳性 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非沙门氏菌
4聽聽聽聽尿素酶试验阴性,表4生化反应聽"O"因子血清分群阳性聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽沙门氏菌
聽聽聽聽聽3～5项中任一项不符合沙门氏菌
5聽聽聽尿素酶试验阴性,表4生化反应
聽聽聽聽2～5项中任一项不符合沙门氏菌聽"O"因子血清分群阴性聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非沙门氏菌
6聽聽尿素酶试验阴性,表4生化反应
聽聽聽2～5项中任二项或二项以上不符沙门氏菌聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非沙门氏菌
7聽聽符合表4中亚利桑那菌生化特性聽聽聽"O"因子血清分群阳性 亚利桑那菌
聽聽8符合表4中亚利桑那菌生化特性聽聽聽"O"因子血清分群阴性聽聽菌落典型, 亚利桑那菌
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽镜检革蓝氏
聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽阴性无芽胞杆菌
9聽尿素酶试验阳性 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非亚利桑那菌
10聽聽尿素酶试验阴性,表4生化反应聽聽"O"因子血清分群阳性聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽亚利桑那菌
聽聽3～5项中任一项不符合亚利桑那菌
11聽尿素酶试验阴性,表4生化反应聽聽聽聽"O"因子血清分群阴性聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非亚利桑那菌
聽聽聽2～5项中任一项不符合亚利桑那菌
12聽聽尿素酶试验阴性,表4生化反应 聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽非亚利桑那菌聽聽2～5项中任二项或二项以上不符亚利桑那菌
注:聽①丙二酸钠试验阴性,卫矛醇试验反应不定的菌株,按上述1～6类别结果进行判断。
②丙二酸钠试验阳性,卫矛醇试验阴性的菌株,按上述7～12类别结果进行判断。
③如以上生化项目仍不能判定时,可按P·R·爱德华,W·H·爱文:《肠杆菌科的鉴聽定》(1978中译本),扩大必要的生化试验。结合血清学作综合判定。聽聽聽聽
聽聽聽

聽

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