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鲜乳中抗生素残留检验——2008GB



录入时间:2009-4-24 15:43:19 来源:青岛海博论坛论坛生物

一、培养基明细:
聽聽聽聽名称聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽规格聽聽聽聽聽聽聽价格(元)
营养琼脂(NA)聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽250g聽聽聽聽聽聽聽聽80
2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)聽聽聽聽聽聽聽10g聽聽聽聽聽聽聽聽聽135
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基聽聽聽聽聽聽聽聽250g聽聽聽聽聽聽聽聽75
脱脂乳聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽*聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽*
青霉素G参照溶液聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽*聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽*
磷酸盐缓冲液(PH7.2)聽聽PBS聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽250g聽聽聽聽聽聽聽聽聽80
二、备注
1、湿热链球菌抑制法:
聽聽聽样品经过80℃杀菌后,添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后,嗜热链球菌开始增殖。这时候加人代谢底物2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC),若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,嗜热链球菌将继续增殖,还原TTC成为红色物质。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,则嗜热链球菌受到抑制,因此指示剂TTC不还原,保持原色。
2、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法
聽聽聽聽培养基预先棍合嗜热脂肪芽胞杆菌芽胞,并含有pH指示剂(澳甲酚紫)。加人样品并孵育后,若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,细菌芽胞将在培养基中生长并利用糖产酸,pH指示剂的紫色变为黄色。相反,如果样品中含有高于检测限的抗生素,则细菌芽胞不会生长,pH指示剂的颜色保持不变,仍为紫色。
3、湿热链球菌抑制法判断方法
聽聽聽在白色背景前观察,试管中样品呈乳的原色时,指示乳中有抗生素存在,为阳性结果。试管中样品呈红色为阴性结果。如最终观察现象仍为可疑,建议重新检测。
4、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法判断方法
聽聽聽在白色背景前从侧面和底部观察小试管内培养基颜色。保持培养基原有的紫色为阳性结果,培养基变成黄色或黄绿色为阴性结果,颜色处于二者之间,为可疑结果。对于可疑结果应继续培养30min再进行最终观察。如果培养基颜色仍然处于黄色一紫色之间,表示抗生素浓度接近方法的最低检出限,此时建议重新检测一次。
5、4%2,3,5一氯化三苯四氮哇(TTC)水溶液
聽聽成分聽聽聽
聽聽聽聽聽聽2,3,5一氯化三苯四氮哩(TTC)聽聽聽1g
聽聽聽聽聽聽灭菌蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽5mL
聽聽制法聽聽
聽聽聽聽称取TTC,溶于灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于2℃一5℃保存。如果溶液变为半透明的白色或淡褐色,则不能再用。临用时用灭菌蒸馏水5倍稀释,成为4%水溶液。
6、青霉素G参照溶液
聽成分聽
聽聽聽聽青霉素G钾盐聽聽聽聽聽聽30.0mg
聽聽聽聽无菌磷酸盐缓冲液聽聽适量
聽聽聽聽无抗生素的脱脂乳聽聽适量
聽制法聽聽聽聽精密称取青霉素G钾盐标准品,溶于无菌磷酸盐缓冲液中,使其浓度为100IU/mL—1000IU/ml。再将该溶液用灭菌的无抗生素的脱脂乳稀释至0.006IU/mL,分装于无菌小试管中,密封备用。-20℃保存不超过6个月。聽聽聽
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